当前的世界环境

介绍

自由生活的变形虫包括Acanthamoeba.那Hartmannella.那Vahlkampfia.那Vannella.和Naegleria是小型两栖类原生动物寄生虫，以细菌和真菌等自然环境物质为食。这些生物能抵抗极端的环境条件，包括不利的温度，pH范围和暴露在包囊期的化学物质，当条件变得有利时，它们转移到滋养体(Stockman)et al .,2011)(佩尔蒂埃等, 2011)

可从水资源、土壤、污水甚至隐形眼镜清洗液和透析机中分离出自由生活的阿米巴原虫(Marciano-Cabral et al.，2003)。阿米巴角膜炎(AK)最常见的病因与Acanthamoeba.软性隐形眼镜使用不当，如佩戴隐形眼镜时淋浴或在可疑水源游泳(Martinez AJ et al.，1997)(Radford CF et al.，1992)。上述感染导致严重的眼睛疼痛，葡萄膜炎伤口，畏光和失明(Dart, 1993)。

与Amoebic角膜炎不同，只有来自免疫功能的个体的肉芽肿性肿瘤脑炎（GAE）。实际上，正常的免疫系统可以防止寄生虫发病机制。GAE中的寄生虫入口的主要途径是囊肿吸入和接触皮肤伤口与受污染的环境来源（Marciano-Cabral等, 2003)。

虽然一些药物如双胍、二胺和三唑是两种疾病的选择，但治疗是困难的，在大多数情况下都失败了。值得一提的是，其他自由生活的变形虫，如Vahlkampfia.和Hartmannella.可能是免疫活性和免疫抑制患者感染的原因。有趣的是，近年来，在伊朗有几个病例报道，由于Vahlkampfia和Hartmannell(Niyyati M et al.，2010)。需要指出的是，由于高危人群的数量不断增加和致病性的扩大传播弗拉，将来可以预测爆发。总体而言，娱乐水体中的自由生活amoebae发生可能构成高风险的Amoebae来源，包括隐形眼镜佩戴者和免疫抑制患者。

Kaleybar和Khomarlou城市是Kaleybar和Khodaafarin县的中心，分别位于伊朗西北部的东阿塞拜疆省。Kaleybar和Khodaafarin酒店位于海拔1240米。两位县共同有2012年人口普查（分别为48837和34977）83814的人口。县总面积为3702公里²．Kaleybar和Khodaafarin属于山地气候，四季分明。

综上所述，卡拉巴尔县和霍达法林县的水体中没有关于自由生活阿米巴的发生的数据，因此本研究采用形态学关键字来澄清自由生活阿米巴的存在。据我们所知，这是该区域发生FLA的首次报道。

材料和方法

抽样

2014年3月和11月，在东阿扎尔巴扬省Kaleybar县和Khodaafarin县不同水源采集50个水样(500-1500ml)(图1)，包括温泉(3个样本)、冷泉(29个样本)、河流(5个样本)、水井(2个样本)、精制饮用水(10个样本)和地下运河(1个样本)。这些样本被转移到伊朗德黑兰Shahid Beheshti医学科学大学的原生动物学实验室，并在室温下保存。

图1：星显示Kaleybar和Khodaafarin在东阿塞拜疆省的位置 点击此处查看图

过滤和栽培

通过纤维素膜（膜的孔径等于1.6μm）过滤约250ml的每个样品。^10.在过滤每个膜的中间部分后，切出并培养。培养在含有1.5％的非营养琼脂上进行的大肠杆菌细菌。然后在室温下培养两个月。

微观检查和克隆

对车牌的调查在一周后开始，并每天持续到两个月。阳性样品使用x100倍放大的光镜进行鉴定。然后进行克隆，消除细菌和真菌污染，并在混合变形虫板中分离每个自由活的变形虫克隆。根据每个克隆变形虫的形态学特征，以网页键为基础进行鉴定。

结果

在50个样品中总共20个（％40）在微观检查中为阳性。孤立的属于Acathameobae.属（图2和3），Thechameoba(图4),Hartmannella.(图5),Valkamphiids和Vannella.（图6）。Acanthamoeba.由其双壁形状和平坦的滋养本质进行检测，具有明显的刺激菌。Hartmannellidae虫形、滋养体和小而圆的包囊。Vannella.其特征在于它的扇形滋养体和Vahlkampfids.圆形囊肿，测量约为10微米，其滋养本质长而潮湿。

正水资源和分离的amoebae的数量和百分比分别显示在表1和表2中。

表1水资源正样本(数量和百分比)

表2：来自水样的孤立的自由生活Amoeba及其百分比

图2：Acanthamoeba平形滋养色素（X100） 点击此处查看图

图3:棘阿米巴囊肿(x100) 点击此处查看图

图4：Thechamoeba滋养本地的丛 点击此处查看图

图5:Hartmanellidae囊肿(x100) 点击此处查看图

图6:带有扇形滋养体的Vannella (x100) 点击此处查看图

讨论

本研究采用培养和显微调查的方法，对喀雷巴尔县和霍达法林县的水资源进行了自由生活阿米巴的发生情况调查。目前的研究表明，50个水样中有20个(%40)被潜在致病性的自由活变形虫污染。大约一半的样本(20个样本中的9个)混合污染，并检测到各种变形虫。正如预期的频率Acanthamoeba.20个样品中有12个样品的种类较多，属最少Thechameoba(20个阳性样本中的2个)。此外，本研究还发现，不同类型的水资源(冷泉、温泉、精制饮用水、河流和井水)至少有一种阿米巴原虫被污染，但5个样本中有4个样本的河水污染程度最高。虽然地下管道的样本结果是阴性的，但由于样本数量少(1个样本)，这一结果不可靠。

根据Bagheri等人的研究，94份自来水样本中有45份(%48)被污染acanthamoeba。^11.本研究的样本取自伊朗不同城市医院的自来水。根据我们的研究Acanthamoeba.他们的研究中也含有污染。高发生Acanthamoeba.主要是由于它能抵抗极端的环境条件。这种程度的抗性有助于囊肿期的形态变化和发展。包囊形态对温度、pH值和渗透性有很大的抗性。

Ghadar-ghadr等人通过培养、姬姆萨染色和显微调查等方法报道了自由生活的阿米巴原虫污染不同种类的水资源的%48 (Solhjoo K et al.， 2012)Naegleria和Acanthamoeba。

Nazar等人测定了%32的污染Acanthamoeba.(Nazar M et al.，2011)本研究的样本取自公园和公共广场。上述研究报告的污染程度较高Acanthamoeba.与目前的研究相比，他们没有识别其样品中的其他自由活amoebae。西班牙的另一项研究显示，88分中的48例（％59.5）含量Acanthamoeba.．

目前研究中的其他鉴定的amoebae是Hartmannellidae和Vahlkampfiids两者都是伊朗和世界范围内阿米巴角膜炎的病原体。^8、9目录炎由于Hartmannella.和Vahlkampfia.预后也很差，可能会导致失明。因此，娱乐用水对这种变形虫的污染可能会对高危人群的健康造成危害，有必要教育佩戴隐形眼镜的人避免接触可疑的水。

在Kalaybar县和Khodaafarin县不同的自然水资源中发现了大量的自由生活变形虫。这是第一个研究表明该地区水体污染会释放活的阿米巴，这个问题可能反映出潜在的危害，特别是对隐形眼镜佩戴者和免疫抑制患者。在康乐水域张贴警示标志，可预防自由生活的变形虫相关感染。该地区游离变形虫的分子分析有待进一步研究。

确认

Maryam Niyyati博士一直受到Elite Foundation的年轻关联教授的资助。

谢谢是由于Kamandar Sheikhzadeh先生，Jabbar Dirineh先生，Seyed Ahmad Karamati先生和Amir Reza Javadi先生为他们提供了各种处理样本的帮助。

参考文献

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