当前世界环境

介绍

植酸酶(肌醇六磷酸磷酸水解酶)是任何一种催化水解植酸(肌醇六磷酸磷酸)的磷酸酶，植酸是一种难以消化的有机形式的磷，存在于谷物和油料种子中，并释放出一种可用形式的无机磷。¹虽然植酸酶已被发现存在于动物、植物、真菌和细菌中，但植酸酶最常从真菌中检测和表征。²在现代生物技术时代，酶的市场需求已经超过了其他生物技术产品，年销售额接近20亿美元。植酸酶(Phytases, EC 3.1.3.8)是一种催化磷酸基水解的磷酸酶，由于其作为饲料补充的广泛应用，在酶业中占有很大的份额。^{3 - 6}植酸酶可提高单配偶动物体内矿物质、蛋白质和磷的生物利用度。它们减少了集约化畜牧业生产地区的磷污染。^7、8植酸酶的热稳定性表明其作为去除植酸的生物剂在造纸工业中具有潜在的生物技术应用前景。植酸的酶解降解不会产生有毒的副产物，对环境友好。¹⁰大量的微生物包括细菌、酵母和丝状真菌被用于植酸酶的生产。特定微生物的选择取决于基质的性质、环境条件和所需的最终产品。嗜热真菌有复杂的或不寻常的营养需求和众所周知的微生物生产植酸酶。^{11 - 14号}鉴于植物酶的增加，植物酶以成本有效的方式生产植酸酶。商用进料制剂所需的植酸酶必须符合以下规格，即在更宽的pH范围内的热稳定性和活性，这仅是有用的热嗜热真菌。家禽粪便是一种有用的营养源供应植物酶和高可用的磷玉米饮食，对Poultry粪肥和粪便修正的Poultry粪肥和土壤中P，Cu和Zn的溶解性和植物摄取。因此，目前的研究旨在孤立的目的是来自局部栖息地的嗜热真菌菌株，筛选植酸酶生产后优化。

目的和目标

1. 目的分离和鉴定能大量水解植酸酶的真菌。
2. 估计从开放的天然发酵罐和家禽农场附近的土壤中从真菌微生物的植酸酶酶的量。
3. 植酸酶活性条件的优化。

材料与方法

样品的来源

来自家禽农场垃圾的土壤样品，2 kali是米饭的发酵废水，这是村民烹制谷物食品的村民。这些牛的液体饲料是微生物的良好来源，有助于食物中的维生素和酶。它们含有许多包括植酸酶的麸皮衍生材料。

隔离的生物

用三种不同的样品分离生长周期中具有产植酸酶能力的真菌。在瓦朗加尔及其周边地区采集家禽土壤、磷矿和库迪土样品。样品采用连续稀释法处理。¹⁵家禽养殖场土壤样品采用无菌塑料袋采集。取1克样品悬浮于100ml无菌蒸馏水中，室温静置过夜。土壤悬浮液进一步稀释至104-106倍。然后将一毫升这种稀悬液转移到含有马铃薯葡萄糖琼脂培养基的培养皿中。在培养皿中加入10mg /L的青霉素和链霉素(1:1)，从细菌污染物中进一步纯化真菌培养物。另外两个样本Kudithi和Kali是在瓦朗加尔镇不同牛棚和郊区不同房屋的无菌瓶中收集的。

形态出现

所有菌株均经镜检鉴定。^16,17,18拾取每个鉴定的分离物的独立菌落并转移到马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）倾斜上进行培养维护。将培养物在4℃下储存在冰箱中以进一步研究。

培养液

3 ~ 5 d斜培养的孢子在每个斜培养中加入10 mL无菌的0.005% Monoxal O.T(磺丁二酸钠二乙酰酯)浸湿。用消过毒的接种针头划伤孢子，然后轻轻摇动试管，使孢子簇破裂。孢子悬液作为无接种物。用改良的纽鲍尔血球计测定孢子密度(每单位体积的孢子数)来测定接种量;precicdor，德国HBG (Tiefe深度深度0.10 mm和0.0025mm2面积)。

植酸酶测定

对改性后的植酸酶进行了活性测定¹²和¹³使用探究性 - 肖尔试剂测定使用植物钠作为癫痫的植物释放的无机磷的方法。将半毫升植物钠（0.00682m）加入至MgSO至0.1ml₄(0.05M)和0.1mL醋酸钠缓冲液(0.2M)。在上述混合物中加入酶液(0.1 mL)， 50℃孵育30min。孵育后，加入1.0 mL 10%三羧酸(TCA)和2.0 mL蒸馏水。混合均匀，加入5.0 mL Taussky-Schoor试剂。将10.0 g钼酸铵与10.0 mL H混合，制得Taussky-Schoor试剂₂所以₄（10N）并进一步用70.0ml去离子水稀释。然后5.0克硫酸硫代硫酸盐（FeSO4.7h₂o）加入并制备终体卷积100.0ml。通过使用分光光度计在660nm下测量吸光度，并在将已知浓度的KH浓度的吸光度进行比较后估计估计磷酸盐₂阿宝₄使用相同的测定条件而不是酶。一种单位的ophytase活性定义为“在温度（50℃）和pH（5）的温度（5）pH（5）”中释放一μmol磷酸的酶量。

统计分析

Duncan以概率值形式的多个范围测试用于找出复制之间的显着差异。Snedecor＆Cochrane（1980）使用计算机软件Costat，3.03berkeley，CA 94701，治疗效果在Snedecor＆Cochrane（1980）中进行了复合。

结果与讨论

Kudithi和Kali都含有能产生植酸酶的微生物。从堆肥土壤中分离出烟曲霉、腐殖酸霉、发根霉、嗜热孢霉、产植酸霉菌等5种不同类型的嗜热真菌7株，并对其产植酸酶进行筛选。aspergillus fumigatus植物溶酶产生0.04 U / ml / min，而Humicolainsolens，Rhizomucor Miehei-I＆II，Sporotrichum嗜热，Thermomyces Lanuginosus-I＆I，分别得到0.22,0.20,0.76,2.20,0.20和0.53 U / ml / min。在浮酶生产中筛选的七种药物真菌菌株中，Sporotrichum热疗法均在固态小麦麸皮（表1）上生长时产生更高的细胞外植酸酶。Chadha等人，（2004）分离和筛选出嗜热真菌，并发现富含植酸酶产生的富含植酸酶生产的富含植物菌株，如根茎毒素，湿润毒素，Humicola Grisea，Sporotrichum嗜热，Humicola Insolens，Thermomyyceslanuginosus-i，Thermomyce Lanuginosus-II，Rhizomucor Miehei-i，根瘤菌宫内节油曲霉属fumigatus。Singh＆Satyanarayana（2008）还调查了Hathorotrichum嗜热有可能增强植酸酶的产生。发酵过程的主要产物通常决定了碳源的选择，特别是如果产品因其直接异化而导致的碳源。在微生物发酵过程中使用碳水化合物是碳水化合物是常识。

结论

在微生物的生长周期中释放的植物酶特别是真菌和细菌，该研究在改善碳源源自源的植物营养方面发挥着至关重要的作用，该研究基于印度富源的富裕源的背景当蛋白质和碳水化合物中，在Kali和Kudhithi生长并释放植酸酶时，真菌使用该组分。这种植物kali和kudhithi被用作动物的饲料，但在动物的消化中有一种并发症，这被释放出来，以消化为环境。动物的官方可以用作领域的粪便。

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