当前世界环境

介绍

化学品是现代生活的一部分。它们是人类生活中所有领域的一部分，用作药品，农药，洗涤剂，肥料，染料，防腐剂，食品添加剂等。每天生产的药物废物可能是陆地填充，条件是它们以大量的一般废物分散．然而，即使少量，细胞毒性和麻醉药物也不应该是填充的土地。温和的液体或半液体药物，例如含维生素，咳嗽糖浆，静脉内溶液，滴度等的溶液（但不是抗生素或细胞毒性药物），可以在大弓中稀释，并排入城市下水道。石油烃可分为四类，即饱和，芳烃，沥青铁（苯酚，脂肪酸，酮，酯和卟啉），以及树脂（吡啶，喹啉，咔唑，亚砜和酰胺）。

苯酚,C₆H₅哦或羟基苯，是含有附着在苯环结构上的羟基的芳族分子。苯酚通常称为碳酸的分子量为94.11 gm / m¹．它具有43℃的熔点，形成白色至无色晶体，无色至粉红色固体或厚液体。苯酚是煤焦油的组成部分，在有机材料的分解期间形成。摄入甚至少量可能导致呕吐，循环问题，瘫痪，抽搐和昏迷。苯酚会影响神经系统和关键器官，即脾脏，胰腺和肾脏。

萘PAHS包括萘（2环），芴（3环），苯并（a）蒽，菊苣，氟，芘（4环）和苯并（a）芘（5环）。暴露于萘蒸汽导致恶心，呕吐，腹痛和贫血增加血清胆红素，满足血红蛋白，海因斯体，和碎片红细胞血尿，贫血，躁动和肝脏增大²．

微生物降解在有氧呼吸中，氧作为电子受体。分子氧是加氧酶的反应物，并被并入最终产品中。在厌氧呼吸过程中，释放出不同的无机电子受体，如NO_3.， 所以₄，所以，co₂和菲_3.在微生物降解。以下微生物对苯酚和萘的降解负有责任。acinetobactersp。关节杆菌sp。^3.芽孢杆菌sp。⁴微球菌sp。Nocardia.sp。假单胞菌sp。⁵p . pictorum- nicm-2077，rhodocccus.SP，DCB-P0610镰刀——f·FE11青霉米AF2，AF4，⁶豆类sp。假丝酵母tropicalis．考虑到微生物作为降解废物，特别是药物残留的良好来源的多才多艺的性质，试图了解微生物在降解药物废物方面的效用。

材料和方法

收集的样本

从赛中收集土壤样品钦奈的Meera Pharma行业。样本是通过预先灭菌收集在聚乙烯袋中抹刀。

筛选苯酚和萘降解生物体

一氧克的土壤样品连续稀释稀释至106倍，涂于最少的琼脂上含10毫克/ 100毫升苯酚的培养基杀菌后加入的萘平板于28°C孵育5天⁷．

富集孤立的菌株

在营养肉汤中制备18小时选择的培养物。取出一种这种浑浊肉汤，并加入到49ml液体矿质中，该液体介质补充在无菌250mL锥形瓶中的10mg苯酚和萘，并在120rpm处保持在旋转振荡器5天⁸．

潜在酚类和萘降解菌株的选择（平板法）

用少量琼脂培养基增加所选苯酚的浓度萘如下，如下10mg / 100ml，20 mg / 100Ml, 30 mg/100 Ml, 40 mg/100 Ml, 50 mg/100将富含富集的培养物接种在最小值上琼脂媒体。培养皿在室内培养温度48-72小时。⁸

自由细胞降解

筛选出的潜在菌株为18小时后接种在10mL营养液中将5毫升这种营养肉汤孵育到95毫升最低培养基中含有不同的苯酚和萘浓度单独为30mg / 100ml，40mg / 100毫升，50mg /100ml。每一个都删除3ml样品用色度计在600 nm。等分试样样品是以1000rpm离心5分钟和上清液，用于研究苯酚和萘使用4-氨基氨基沙替尼德⁴．

4-Amino Antipyrene方法

苯酚和萘化合物在叔丙酸钾存在下在pH 7.9±0.1时与4-氨基脱乙烯反应（K._3.Fe（CN）6）并形成粉红色的抗亚丁烯染料。将该染料保持在水溶液中，并在500nm处监测吸收率。⁴

PH与温度潜在应变效应优化苯酚和萘降解

制备最小琼脂培养基用不同的pH（5,7和9）和不同温度(28ºC, 37ºC, 45ºC) 48-72小时也加入50mg苯酚和萘分别地。

制备固定细胞

苯酚和萘（0.01％）作为唯一的碳的来源和保持在旋转振动筛120rpm, 30ºC 72小时。3克海藻酸钠将100ml蒸馏水溶解在100ml蒸馏水中，彻底混合并高压灭菌。然后使用磁力搅拌器用3ml潜在的肉汤培养搅拌。然后将最终混合物通过针挤出成200ml的0.05m CaCl₂溶液中可得3 - 4毫米直径的海藻酸珠。20 min后，滤除微球，保存在0.05 % CaCl中₂冰箱中的溶液。⁹

固定化细胞降解苯酚和萘的研究

放置固定珠15克加入100毫升含有所需的苯酚量(30 mg/100 ml, 40 mg/100毫升，50毫克/100毫升)。等分的样本肉汤文化定期拍摄4-氨基脱乙烯的降解研究方法。

潜在菌株的鉴定

表型特征，如微形态(革兰氏染色、荚膜染色、孢子内染色和运动)、培养特征(在基础培养基、差异培养基和选择性培养基上)和生化特征(过氧化氢酶、氧化酶、IMViC)。根据所研究的表型特征结果，所有选定的细菌分离株都在伯杰确定细菌学手册的帮助下进行了鉴定^10.．

结果与讨论

筛选苯酚和萘降解生物体

在孵化的第三天，2天菌落由含酚板和三测定了含萘平板上的菌落观察并进一步温育板。5天后，来自苯酚的另外两种菌落包含板和三个菌落萘板形态观察到不同的菌落。10完全隔离酚和萘的降解并命名为P1到P10菌株。所选菌株的砧木培养为保持。里戈和阿勒格里，用酚作为唯一的矿物盐中的碳源用于隔离过程7的培养基，在本研究中用作苯酚和萘作为苯酚和萘唯一的碳源是筛选方法退化。

苯酚和萘降解菌株的筛选

用于使用的富集培养基从混合菌株中分离出的菌株的富集培养物种良好变化的培养物混合的文化⁸．在这项研究中，最小的培养基是用于富集目的。更好的增长是5天后观察。孵化之后，所有的菌株P1 ~ P10在10 mg苯酚和萘浓度下生长，而P7和P10在所有苯酚和萘浓度下降解最大。从这些,P7 P10被选为潜在的压力和进一步的研究(表1)。连续稀释两个殖民地从萘酚板块和三个殖民地板块中观察到两天,在接下来的三天两个殖民地从萘酚和三个殖民地孤立。在无机盐培养基上共观察到10个菌落。

表1：潜在的苯酚和萘降解菌株的选择 点击此处查看表格

自由细胞降解（4-氨基脱乙烯法）

苯酚和萘在不同的将浓度加入到矿物质培养基中通过化学物质（苯酚和苯酚和苯酚）的颜色反应研究了潜在分离株的降解萘)在pH下与氰化钾铁7.9。测量光密度（O.D）值用色度计测定颜色的变化。为了降解研究，不同浓度的苯酚和甲苯（25mg / L，50 mg / L，75毫克使用/ L和100mg / L）。这是有益的生物降解研究它们污染物的数量studied4效果。对于目前的研究，增加苯酚和萘的浓度，如30 mg/ 100ml, 40 mg/ 100ml和50 mg/ 100ml苯酚和萘被用于降解过程。出于两个菌株p7和选择P10作为潜在菌株。(图1至4)。

菌株P7和P10降解苯酚和萘的优化

孵育后，两个培养皿中都有苯酚和萘在不同的pH条件下观察到，观察到更好的增长通过p7和p10在苯酚中的中性pH值萘极板中的中性pH值。(表2& 3)。

表2：pH的效果 点击此处查看表格

表3：pH的影响 点击此处查看表格

温度的影响

孵育后，两个培养皿中都有苯酚和萘在不同的温度下观察条件。菌株P7和P10在28°C和37°C条件下生长较好苯酚板和28°C萘板。(表4＆5）。

表4温度的影响 点击此处查看表格

表5：温度的影响 点击此处查看表格

为优化工艺，报道了不同pH、温度和不同酶活性的普利茅沙雷菌污泥样品^11.其中，在一定的pH和温度下，通过应用不同的pH和温度对微生物降解苯酚优化了细胞的降解^12.．同样，在工作中受最适pH影响的苯酚降解也有报道^13.．在本研究中，P7和P10菌株在中性ph下生长较好，P7和P10菌株在28°C和37°C降解苯酚时生长较好。P7和P10菌株在28°C条件下表现出较好的萘降解能力。

图1:P7游离细胞对苯酚的降解 点击这里查看图表

图2:P7游离细胞对萘的降解 点击这里查看图表

图3：P10的游离细胞酚类降解 点击这里查看图表

图4：萘通过P10的自由细胞降解 点击这里查看图表

图5:P7固定化细胞对苯酚的降解 点击这里查看图表

图6:P7固定化细胞降解萘 点击这里查看图表

固定化细胞的降解研究（4-氨基脱乙烯法）

苯酚的降解加入不同浓度的萘通过潜在的分离液到矿物培养基是研究了化学物质(苯酚)的显色反应和萘）用铁氰化钾pH 7.9。测量光密度值用色度计测定颜色的变化。最近，为了降低更好的优势游离的微生物细胞是各种化学物质的集合固定化。这样他们就可以重复使用循环并与释放细胞进行比较这些显示更好结果。(图5 - 8)固定化节杆菌对于研究的酚类降解^14.．免费的,藻酸盐捕获假单胞菌Sp表示萘生物降解^15.．

潜在菌株的鉴定

基于所研究的表型，潜在菌株被鉴定为芽孢杆菌sp（p7）。Brachybacterium sp（p10）。在这项研究中，芽孢杆菌（p7）和触发杆菌（P10）是潜力降解过程的应变。在这,芽孢杆菌是在苯酚和甲苯中降解⁴而短杆菌是一种新菌株降解苯酚和萘。

图4：萘通过P10的自由细胞降解 点击这里查看图表

图5:P7固定化细胞对苯酚的降解 点击这里查看图表

致谢

我希望真诚地记录我最深的对K.R博士的感激之情Venkatesan M.A.，M.Phil。，博士，校长，Sri Sankara艺术与科学大学，坎奇普兰为他们的宝贵和热情的鼓励在这个状态工作。我向R博士表示衷心的感谢。巴利鲁纳森在这项研究中为他的支持努力。

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